Tài liệu Ứng dụng enzyme lipase ngoại bào trong sản xuất lipolyzed milk fat (lmf)x

Ứng dụng enzyme Lipase ngoại bào trong sản xuấất Lipolyzed Milk Fat (LMF) Giảng viên hướng dấẫn: TS. Đỗẫ Biên Cương htps://,,,.nbbi.nlm.nih.gov/pmb/artbles/pMC627P487273// 1. Tổng quan Nguỗồn enzyme Vi sinh vật Động vật Thựb vật • Có hoạt tnh lipase bao và ổn định • phù hợp trong sản xuấất bỗng nghiệp 1. Tổng quan - Lipase bỗấ định trên xáb têấ bào Yarrowia lipolytca sau khi siêu ấm bủa têấ bào nấấm men (LipImDebri). - Thiêất bị phản ứng: 4L, 274h, bhấất bảm ứng: dấồu rán. + Lipase ngoại bào: 4P3/27.1 U/L. + Lipase nội bào: 13/0.0 U/g. + Xáb têấ bào sau khi siêu ấm: 1871.0 U/g. -Yarrowia lipolytca là một trong những loại nấấm men mới đượb nghiên bứu nhiêồu nhấất với báb quá trình bỗng nghệ sinh họb do khả năng têất ra một sỗấ bhấất bhuy ển hóa v ới sỗấ l ượng lớn (ví dụ: axit xitrib và báb protein ngoại bào). + Y. lipolytca bó thể đượb sử dụng như báb enzym nhấn tạo tự do, giảm bhi phí quy trình (khỗng bấồn hỗẫ trợ thêm bũng như quá trình bỗấ định tỗấn thời gian) và thúb đ ẩy quá trình th ủy phấn triabylglyberol hiệu quả. + Là một bhấất xúb táb sinh họb bỗấ định, nó bũng bó thể đượb thu hỗồi và tái s ử d ụng  Cho phép sử dụng hiệu quả vêồ bhi phí, ví dụ, hoạt động liên tụb, bỗấ định 27. Tỗấi ưu Sơ đỗồ bủa lipase bỗấ định trên báb xáb têấ bào Yarrowia lipolytca sau ly tấm (LipImDebri) 27. Tỗấi ưu 3/PoC pH = P Ảnh hưởng bủa Nhiệt độ (a) và pH (b) lên hoạt động thủy phấn bủa lipase bỗấ định trên xáb têấ bào Yarrowwia lipolytca trong p –nitrophenyl laurate 27. Tỗấi ưu Tính bêồn nhiệt bủa lipase trên thành têấ bào Yarrowwia lipolytca đượb ủ ở 3/PoC trong dung dịbh đệm phosphat 50 mM; pH = P,0 27. Tỗấi ưu Ảnh hưởng bủa mỗi trường đêấn hoạt độ bủa lipase trên thành têấ bào Yarrowwia lipolytca đượb ủ ở 3/PoC trong dung dịbh đệm phosphat 50 mM; pH = P,0; 3/0 phút 3/. Ảnh hưởng bủa lipase đêấn phấn giải bhấất béo trong sữa Lipase thủy phấn Lipase Lipase este hóa • Trung tâm hoạt động của bao gồm bộ ba serine, histidine và aspartate hoặc glutamate (His-Ser-Asp / Glu). • Bộ ba xúc tác này được vùi dưới bề mặt. Bề mặt này sẽ trải qua những thay đổi về cấu trúc do sự hoạt hóa bề mặt để dẫn đến sự hoạt động của các kênh mở  tạo điều kiện cho các vị trí hoạt động được định hướng chính xác cho cơ chất. 1 27 3/ Các vị trí hoạt động của serine được kích hoạt bằng cách loại bỏ H+ ở histidine và aspartate. Các vị trí hoạt động serine phản ứng với nhóm cacbonyl của cơ chất tạo thành chất trung gian acyl-enzyme, được ổn định bởi lỗ oxyanion. Quá trình khử oxy hóa được thực hiện khi một nucleophile tấn công chất trung gian acyl-enzyme để giải phóng một sản phẩm, tái tạo các vị trí xúc tác. 3/. Ảnh hưởng bủa lipase đêấn phấn giải bhấất béo trong sữa Thermomyces lanuginosa và Rhizomucor miehe Lipase đặb hiệu Đặb hiệu vị trí băất Đặb hiệu bơ bhấất Độ đặb hiệu lập thể Lipase đặc hiệu đối với một số axit béo nhất định • axit béo bão hòa hoặc không bão hòa. • axit béo chuỗi dài, trung bình hoặc ngắn • acylglycerol (mono-, di- hoặc tri-acylglycerol ). Lipase đặc hiệu lập thể sẽ thủy phân các axit béo ở vị trí sn -1 và sn-3 với tỷ lệ khác nhau. 3/. Ảnh hưởng bủa lipase đêấn phấn giải bhấất béo trong sữa Cao Hương vị: bơ, kem, sữa,… Thấấp Giàu axit tự do Hương vị bủa bhấất béo sau khi phấn giải bó enzyme lipase 3/. Ảnh hưởng bủa lipase đêấn phấn giải bhấất béo trong sữa 4. phương pháp nghiên bứu Chuẩn bị - Chủng Y. lipolytca - Mỗi trường YpD - 2787oC Lên men - 2787 oC. - 2750 vòng/phút. - 1,5 L/phút. - 274h. Thu hỗồi - 4600 x g; 4 oC; 5 phút. - Đệm: MOpS 2700 mM, pH P,0. - 270000 HZ; 150W; 9 phút. 4. phương pháp nghiên bứu Xáb định hoạt tnh - 1,9 ml p Np-laurate 560 μM (+ đệm 50 mM kali-photphat (pH=P,0)). - 0,1 ml enzyme. - 3/P oC; 100s - OD-410. Kiểm nghiệm trên mấẫu sữa; Theo dỗẫi thành phấồn lipid trong sữa - Săấb ký lỏng bao áp (HpLC). - Săấb ký lỏng (TLC). - Săấb ký khí (GC). Tài liệu tham khảo Hình ảnh + tư liệu đượb tham khảo và sử dụng tại 27 bài báo: 1. htps://,,,.nbbi.nlm.nih.gov/pmb/artbles/pMC627P487273// 27. htps://bore.ab.uk/do,nload/pdf/P0665164.pdf Thank for watching!!!