Tài liệu Luan van tot nghiep duoc si chuyen khoa 1

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG HOẠT CHẤT TRONG VIÊN NÉN BAO PHIM PHÓNG THÍCH KÉO DÀI INDAPAMID LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ CHUYÊN KHOA 1 BÌNH DƯƠNG - 2013 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG HOẠT CHẤT TRONG VIÊN NÉN BAO PHIM PHÓNG THÍCH KÉO DÀI INDAPAMID Chuyên ngành: Kiểm Nghiệm Thuốc – Độc Chất Mã số: 60.73.15 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ CHUYÊN KHOA 1 Người hướng dẫn khoa học: PGS. TS. VÕ THỊ BẠCH HUỆ Bình Dương – 2013 ii LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. iii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan...........................................................................................................ii Mục lục.................................................................................................................... iii Danh mục các từ viết tắt..........................................................................................vi Danh mục các bảng.................................................................................................vii Danh mục các hình..................................................................................................ix Danh mục phụ lục.....................................................................................................x Lời cảm ơn.............................................................................................................xiii Chương 1. ĐẶT VẤN ĐỀ...............................................................1 Chương 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU............................................2 2.1. HOẠT CHẤT INDAPAMID...........................................................................2 2.1.1. Cấu trúc phân tử.............................................................................................2 2.1.2. Phương pháp tổng hợp indapamid..................................................................2 2.1.3. Tính chất lý hóa..............................................................................................3 2.1.4. Đặc điểm Dược lực và Dược động học...........................................................4 2.1.5. Dạng bào chế..................................................................................................6 2.2. NGUYÊN TẮC KIỂM NGHIỆM.....................................................................6 2.3. VIÊN NÉN BAO PHIM PHÓNG THÍCH KÉO DÀI INDAPAMID STADA 1,5 MG SR...............................................................................................................8 2.3.1. Viên tác dụng kéo dài.....................................................................................8 2.3.1.1. Khái niệm mở đầu.......................................................................................8 2.3.1.2. Kỹ thuật điều chế.........................................................................................9 2.3.2. Tá dược liên quan sử dụng trong thành phẩm................................................11 2.3.3. Phương pháp sản xuất....................................................................................12 2.3.4. Yêu cầu bảo quản.........................................................................................13 2.3.5. Kiểm nghiệm.................................................................................................13 iv 2.3.5.1. Kiểm nghiệm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao......................13 2.3.5.2. Thông số thẩm định....................................................................................18 Chương 3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.............................23 3.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU - HÓA CHẤT - DUNG MÔI - TRANG THIẾT BỊ............................................................................................................................. 23 3.1.1. Đối tượng nghiên cứu....................................................................................23 3.1.2. Hóa chất - Dung môi.....................................................................................24 3.1.3. Trang thiết bị.................................................................................................25 3.2. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ........................................25 3.2.1. Xây dựng quy trình định lượng indapamid bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ..........................................................................................................25 3.2.2. Khảo sát, chọn lọc các điều kiện sắc ký.........................................................27 3.2.1.2. Xác định phương pháp................................................................................25 3.2.3. Thẩm định phương pháp................................................................................28 3.2.3.1 Tính tương thích hệ thống............................................................................30 3.2.3.2. Tính đặc hiệu..............................................................................................30 3.2.3.3. Tính tuyến tính...........................................................................................31 3.2.3.4. Độ đúng......................................................................................................32 3.2.3.5. Độ lặp lại....................................................................................................33 3.2.3.6. Độ chính xác trung gian..............................................................................33 3.2.3.7. Khoảng xác định.........................................................................................34 3.2.3.8. Độ ổn định của dung dịch phân tích...........................................................34 3.2.3.9. Độ thô.........................................................................................................35 Chương 4. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN.......................................36 4.1. XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP........................................................................36 4.1.1. Khảo sát điều kiện cột sắc ký.........................................................................36 4.1.2. Khảo sát điều kiện tốc độ dòng......................................................................38 4.1.3. Khảo sát dung môi pha mẫu..........................................................................38 4.1.4. Chọn thể tích tiêm, detector...........................................................................39 v 4.2. QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG INDAPAMID BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO ..............................................................................39 4.3. KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH.......................41 4.3.1.Tính tương thích hệ thống......................................................................41 4.3.2.Tính đặc hiệu..................................................................................................42 4.3.3.Tính tuyến tính...............................................................................................44 4.3.4.Độ đúng..........................................................................................................46 4.3.5. Độ lặp lại.......................................................................................................47 4.3.6. Độ chính xác trung gian.................................................................................48 4.3.7.Khoảng xác định.............................................................................................50 4.3.8. Độ ổn định của dung dịch phân tích..............................................................50 4.3.9. Độ thô............................................................................................................52 4.4.TỔNG KẾT - KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH...........................................................51 4.5. KẾT QUẢ KIỂM NGHIỆM TRÊN 3 LÔ........................................................53 Chương 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ.........................................59 5.1.1. Phương pháp..................................................................................................59 5.1.2. Thẩm định phương pháp phân tích................................................................59 5.1.3. Kết luận.........................................................................................................60 5.2. ĐỀ NGHỊ..........................................................................................................60 TÀI LIỆU THAM KHẢO.......................................................................................57 PHỤ LỤC............................................................................................................PL-1 vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ nguyên % Nghĩa tiếng Việt Phần trăm AS Asymmetry factor Hệ số kéo đuôi (hệ số đối xứng) RS Resolution Độ phân giải C Concentration Nồng độ Sắc ký pHigh lỏng hiệu Confidence limit Giới hạn tin cậy Mức ý nghĩa PDA performan Photo diode array Dãy diod quang PL Phụ lục RSD Relative standard deviation S Độ lệch chuẩn tương đối Diện tích pic SD Standard deviation S/N Tỉ số tín hiệu/nhiễu tR Retention time DĐVN Độ lệch chuẩn Thời gian lưu Dược điển Việt Nam BP British Pharmacopoeia Dược điển Anh USP United State Pharmacopoeia Dược điển Mỹ ACN Acetonitril Acetonitril MeOH Methanol Methanol EtH Ethanol Ethanol TEA Triethylamine Triethylamin TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng TB xTB Giá trị trung bình TDKD Tác dụng kéo dài vii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2-1. Thành phần công thức...........................................................................11 Bảng 3-1. Danh sách hoạt chất và tá dược............................................................24 Bảng 3-2. Danh sách hóa chất và dung môi..........................................................24 Bảng 3-3. Danh sách thiết bị kiểm nghiệm...........................................................25 Bảng 3.4. Các yếu tố cần khảo sát phương pháp sắc ký........................................28 Bảng 3-5. Nồng độ các dung dịch – tính tuyến tính...............................................31 Bảng 4-1. Tính chất của một số pha động trong sắc ký lỏng.................................37 Bảng 4-2. Kết quả khảo sát tốc độ dòng................................................................38 Bảng 4-3. Khảo sát tính tan trong dung môi..........................................................38 Bảng 4-4. Kết quả tính tương thích hệ thống.........................................................42 Bảng 4-5. Thành phần placebo..............................................................................43 Bảng 4-6. Sự phụ thuộc của diện tích pic vào nồng độ..........................................46 Bảng 4-7. Nồng độ dung dịch chuẩn – độ đúng.....................................................46 Bảng 4-8. Kết quả độ đúng....................................................................................46 Bảng 4-9. Nồng độ dung dịch chuẩn – độ lặp lại...................................................47 Bảng 4-10. Kết quả độ lặp lại................................................................................47 Bảng 4-11. Nồng độ dung dịch chuẩn – độ chính xác trung gian..........................48 Bảng 4-12. Kết quả - độ chính xác trung gian.......................................................48 Bảng 4-13. Kết quả so sánh giữa độ lặp lại và độ chính xác trung gian................49 Bảng 4-14. Kết quả phân tích hồi quy so sánh độ chính xác.................................49 Bảng 4-15. Nồng độ dung dịch chuẩn – độ ổn định của dung dịch.......................50 viii Bảng 4-16. Kết quả độ ổn định của dung dịch chuẩn............................................50 Bảng 4-17. Kết quả độ ổn định của dung dịch thử.................................................51 Bảng 4-18. Nồng độ dung dịch chuẩn – độ thô của dung dịch..............................52 Bảng 4-19. Kết quả thay đổi pH dung dịch đệm – độ thô của dung dịch...............52 Bảng 4-20. Kết quả thay đổi tỷ lệ pha động – độ thô của dung dịch.....................53 Bảng 4-21. Kết quả thay đổi tốc độ dòng – độ thô của dung dịch.........................54 Bảng 4-22. Kết quả thẩm định phương pháp phân tích..........................................55 Bảng 4-23. Nồng độ dung dịch chuẩn – kiểm nghiệm trên 3 lô thành phẩm.........56 Bảng 4-24. Kết quả kiểm nghiệm độ đồng đều hàm lượng trên lô 010813/0011...57 Bảng 4-25. Kết quả kiểm nghiệm độ đồng đều hàm lượng trên lô 020813/0012...57 Bảng 4-26. Kết quả kiểm nghiệm độ đồng đều hàm lượng trên lô 030813/0013...58 Bảng PL3-1. Kết quả kiểm nghiệm độ hòa tan lô 050413/0041, thời điểm 4 giờ ............................................................................................................................ PL33 Bảng PL3-2. Kết quả kiểm nghiệm độ hòa tan lô 050413/0041, thời điểm 8 giờ ............................................................................................................................ PL33 Bảng PL3-3. Kết quả kiểm nghiệm độ hòa tan lô 050413/0041, thời điểm 16 giờ ............................................................................................................................ PL33 ix DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1. Cấu trúc phân tử của indapamid...............................................................2 Hình 2.2. Tạp A: (2RS)-2-methyl-1-nitroso-2,3-dihydro-1H-indol.........................7 Hình 2.3. Tạp B: 4-chloro-N-(2-methyl-1H-indo1-1-y1]-3-sulphamoylbenzamid. .7 Hình 2.4. Sắc ký đồ một chất.................................................................................14 Hình 2.5. Tính bất đối của pic.................................................................................16 Hình 2.6. Mô tả sự tách hai chất A và B với 3 độ phân giải....................................17 Hình 3.1. Hình chụp viên nén bao phim phóng thích kéo dài Indapamid STADA 1,5 mg SR................................................................................................................ 23 Hình 4-1: Đồ thị liên quan tuyến tính.....................................................................45 x DANH MỤC PHỤ LỤC Phụ lục 1. Các sắc ký đồ đại diện thẩm định phương pháp phân tích...........PL1 PL 1.1. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – tính tương thích hệ thống.............................PL1 PL 1.2. Sắc ký đồ của mẫu trắng – độ đặc hiệu....................................................PL2 PL 1.3. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – độ đặc hiệu...................................................PL2 PL 1.4. Sắc ký đồ của mẫu placebo – độ đặc hiệu................................................PL3 PL 1.5. Sắc ký đồ của mẫu placebo thêm chuẩn – độ đặc hiệu.............................PL3 PL 1.6. Sắc ký đồ của mẫu thử – độ đặc hiệu.......................................................PL4 PL 1.7. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – tính tuyến tính..............................................PL5 PL 1.8. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 70% - tính tuyến tính...................................PL5 PL 1.9. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 80% - tính tuyến tính...................................PL6 PL 1.10. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 90% - tính tuyến tính.................................PL6 PL 1.11. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 100% - tính tuyến tính...............................PL7 PL 1.12. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 110% - tính tuyến tính...............................PL7 PL 1.13. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 120% - tính tuyến tính...............................PL8 PL 1.14. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 130% - tính tuyến tính...............................PL8 PL 1.15. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – độ đúng......................................................PL9 PL 1.16. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 70% – độ đúng...........................................PL9 PL 1.17. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 100% – độ đúng.......................................PL10 PL 1.18. Sắc ký đồ của mẫu nồng độ 130% – độ đúng.......................................PL10 PL 1.19. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – độ lặp lại...................................................PL11 PL 1.20. Sắc ký đồ của mẫu thử 1 – độ lặp lại....................................................PL11 PL 1.21. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – độ chính xác trung gian...........................PL12 xi PL 1.22. Sắc ký đồ của mẫu thử 1 – độ chính xác trung gian.............................PL12 PL 1.23. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – độ ổn định dung dịch................................PL13 PL 1.24. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 2h – độ ổn định dung dịch...........................PL13 PL 1.25. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 4h – độ ổn định dung dịch...........................PL14 PL 1.26. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 6h – độ ổn định dung dịch...........................PL14 PL 1.27. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 8h – độ ổn định dung dịch...........................PL15 PL 1.28. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 10h – độ ổn định dung dịch.........................PL15 PL 1.29. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 12h – độ ổn định dung dịch.........................PL16 PL 1.30. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 14h – độ ổn định dung dịch.........................PL16 PL 1.31. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 16h – độ ổn định dung dịch.........................PL17 PL 1.32. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 18h – độ ổn định dung dịch.........................PL17 PL 1.33. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 20h – độ ổn định dung dịch.........................PL18 PL 1.34. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 22h – độ ổn định dung dịch.........................PL18 PL 1.35. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn 24h – độ ổn định dung dịch.........................PL19 PL 1.36. Sắc ký đồ của mẫu thử – độ ổn định dung dịch....................................PL19 PL 1.37. Sắc ký đồ của mẫu thử 2h – độ ổn định dung dịch...............................PL20 PL 1.38. Sắc ký đồ của mẫu thử 4h – độ ổn định dung dịch...............................PL20 PL 1.39. Sắc ký đồ của mẫu thử 6h – độ ổn định dung dịch...............................PL21 PL 1.40. Sắc ký đồ của mẫu thử 8h – độ ổn định dung dịch...............................PL21 PL 1.41. Sắc ký đồ của mẫu thử 10h – độ ổn định dung dịch.............................PL22 PL 1.42. Sắc ký đồ của mẫu thử 12h – độ ổn định dung dịch.............................PL22 PL 1.43. Sắc ký đồ của mẫu thử 14h – độ ổn định dung dịch.............................PL23 PL 1.44. Sắc ký đồ của mẫu thử 16h – độ ổn định dung dịch.............................PL23 xii PL 1.45. Sắc ký đồ của mẫu thử 18h – độ ổn định dung dịch.............................PL24 PL 1.46. Sắc ký đồ của mẫu thử 20h – độ ổn định dung dịch.............................PL24 PL 1.47. Sắc ký đồ của mẫu thử 22h – độ ổn định dung dịch.............................PL25 PL 1.48. Sắc ký đồ của mẫu thử 24h – độ ổn định dung dịch.............................PL25 PL 1.49. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn tại pH 3.4 – độ thô.......................................PL26 PL 1.50. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn tại pH 3.0 – độ thô.......................................PL26 PL 1.51. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn tại tốc độ dòng 1,1 ml/phút – độ thô............PL27 PL 1.52. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn tại tốc độ dòng 0,9 ml/phút – độ thô............PL27 PL 1.53. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn pha động ACN : dung dịch đệm pH 3,2 (52 : 48) – độ thô...............................................................................................................PL28 PL 1.54. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn pha động ACN : dung dịch đệm pH 3,2 (48 : 52) – độ thô ............................................................................................................................ PL28 Phụ lục 2: Kết quả kiểm nghiệm trên 3 lô......................................................PL29 PL 2.55. Sắc ký đồ của mẫu chuẩn – kiểm nghiệm trên 3 lô ..............................PL29 PL 2.56. Sắc ký đồ của mẫu thử 1 – lô 010813/0011..........................................PL29 PL 2.57. Sắc ký đồ của mẫu thử 1 – lô 020813/0012..........................................PL30 PL 2.58. Sắc ký đồ của mẫu thử 1 – lô 030813/0013..........................................PL30 Phụ lục 3: Nghiên cứu mở rộng đề tài.............................................................PL31 PL 3.1: Sắc ký đồ Độ hòa tan – 4 giờ..................................................................PL34 PL3.2: Sắc ký đồ Độ hòa tan – 8 giờ...................................................................PL35 PL3.3: Sắc ký đồ Độ hòa tan – 16 giờ.................................................................PL35 xiii LỜI CẢM ƠN Đầu tiên cho em xin được gởi lời cảm ơn sâu sắc đối với Quý Ban Giám Đốc - Công ty TNHH LD STADA-VIỆT NAM, công ty đã tạo mọi điều kiện, động viên về mặt tinh thần và vật chất để em có được cơ hội tham gia lớp học chuyên khoa 1, được thực hiện và hoàn thành đề tài tại công ty. Em cũng xin gởi lời cảm ơn chân thành đến PGS. TS Võ Thị Bạch Huệ người đã tận tình chỉ dẫn, sửa chữa và giảng giải những vướng mắc mà em đã gặp phải trong quá nghiên cứu. Cô đã cho những ý kiến hết sức xác đáng, cụ thể để em hoàn thành tốt công việc của mình. Đối với các anh chị, các bạn đồng nghiệp tại công ty TNHH LD STADA-VIỆT NAM, cho em gởi lời cảm ơn đến Một lần nữa cho em gởi lời cảm ơn trân trọng đến tất cả. Liên hệ lấy file gốc 0922949197